Con đông trùng hạ thảo là các loại côn trùng, như:

• Ấu trùng và nhộng tằm Bombyx mori
• Nhộng tằm sồi Antherea pernyi
• Sâu hại bắp cải Mamestra brassicae
• Sâu gạo Tenebrio molitor
• Sâu đục thân bắp Ostrinia nubilalis
• Các loại sâu khác như Heliothis virescens, H. zea và Spodoptera.
  

Ngũ cốc có thể là nguyên liệu thay thế cho côn trùng. Koyayashi (1941) đã sản xuất quả thể Cordyceps militaris trên nền cơ chất gạo. Tiếp theo đó, hàng loạt các nghiên cứu khác cũng sử dụng gạo như thành phần chính trong nuôi cấy tạo quả thể nấm này.

Khi sử dụng gạo để nuôi cấy Cordyceps militaris thì tỷ lệ gạo: nước 1:1-1:1,35 được cho là thích hợp nhất để quả thể phát triển nhưng tỷ lệ này tùy thuộc vào độ dẻo của gạo được sử dụng.

Các cơ chất hữu cơ khác có thể được sử dụng để nuôi cấy Cordyceps militaris: bột đậu, cám bắp, hạt kê, cao lương, hạt hướng dương và lúa mì.

Con đông trùng hạ thảo cho năng suất không cao trên môi trường là côn trùng nhưng lại tốt hơn trên môi trường ngũ cốc.

Tuy nhiên, chất lượng nấm Cordyceps militaris nuôi cấy trên côn trùng cho hàm lượng các hoạt chất sinh học quý hiếm như adenosine, cordycepin… cao hơn nhiều so với nuôi cấy trên ngũ côc.

Quả thể thường được tạo ra trong khoảng 35-70 ngày nuôi cấy, tuy theo các cơ chất khác nhau.

Năng suất: thu được 25g quả thể tươi từ 50g môi trường gạo. Cũng có thể thu được lượng quả thể có thể đến 61% trên môi trường gạo. 55-60% trên môi trường có chưa hạt kê.

Nhiệt độ thích hợp để hệ sơi nấm phát triển mạnh là 25 độ C. Nhưng nhiệt độ để hình thành quả thể 18 – 22 độ C
Trong khi đó, nghiên cứu khác lại cho rằng 25 độ C là nhiệt độ tới ưu cho cả hệ sợi lẫn quả thể.

Quả thể Cordyceps militaris không thể hình thành trong bóng tối. Cường độ ánh sáng giới hạn sự phát triển quả thể ở 1400lux.

Các báo cáo gần đây cho thấy cường độ ánh sáng phù hợp cho quả thể phát triển. Nằm trong khoảng 500-1000 lux tùy thuộc vào thời gian chiếu sáng dài hay ngắn